常見問題:點擊了解更多熒光-PCR法。
一.沒有擴增產物
.循環溫度:變性溫度、退火溫度
2.引物設計
3.DNA聚合酶活性
4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份)
5、DNA樣品
二.非特異產物及電泳呈涂布狀
.Mg2 濃度
2.調整引物、模板、聚合酶的用量
3.適當減少循環數
4.適當提高退火溫度,縮短退火或延伸時間?
產品名稱 | 犬源性成分(Canine)核酸檢測試劑盒品牌 |
規格 | 48T/盒 |
分類 | 熒光-PCR法 |
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使用及效果:
PCR反應特點
() 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=0-2g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=0-6g)水平。能從00萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。?3,4,5-*氧苯胺 250mL NP40 Lysis Buffer,High Salt 常溫保存
4,6-二氨基嘧啶 250mL NP40 Lysis Buffer,Low Salt 常溫保存
2-溴苯基硼 250mL NP40 Permeating Solution in PBS,0X 常溫保存
二碳二叔丁酯 250mL NP40 Permeating Solution in TBS,0X 常溫保存
鄰氯苯乙 250mL Nylon Membrane Stripping Buffer,0X 常溫保存
偶氮二甲二異丙酯 25mL Orange-G Loading Dye (6X, Glycerol based) 常溫保存
4-氯啶-2-甲酯 0mL Orange-G/Blue Dye (6X,triple tracker,Ficoll based) 常溫保存
炔丙胺 25mL Orange-G/Blue Dye (6X,triple tracker,Glycerol based) 常溫保存
2-氨基-3-基啶 250mL Para-formaldehyde fixative Solution 常溫保存
2,6-二異丙苯胺 250mL Para-formaldehyde in PBS with Mg++ and EGTA,4% 常溫保存
3,5-二氯啶 250mL Para-formaldehyde in Phosphate Buffer 常溫保存
4-氨基-2-氯苯甲 250mL Para-formaldehyde-Glytaraldehyde in Bicarbonate Buffer 常溫保存
3-氨基-4-基甲 250mL Para-formaldehyde-Glytaraldehyde in PBS 常溫保存
2-啶甲酯 250mL Para-formaldehyde-Glytaraldehyde in Phosphate Buffer 常溫保存
異煙酯 250mL PBlec Washing Solution in PBS,pH7.0,2X 常溫保存
AMBP(alpha--microglobulin/bikunin precursor) 人α微球蛋白/bikunin前體 CAS: 29702-43-0 規格: 00mg
podocin 人Podocin CAS: 23978-09-8 規格: 5mg
Nephrin 人蛋白 CAS: 4685-79- 規格: 0mg
Alpha-MG(Alpha-microglobulin) 人α微球蛋白 CAS: 54-36-3 規格: 250mg
ALB(microalbunminuria) 人尿微量白蛋白 CAS: 78755-8-4 規格: 200mg
AAA(Anti-adrenocortical antibody) 人抗腎上腺皮質抗體 CAS: 規格: 20mg
RANA(rheumatoid arthritis associated nuclear artigen) 人抗類風濕關節炎核抗原 CAS: 規格: 20mg
THP(T-H glycoprotein) 人TH糖蛋白 CAS: 88-33-6 規格: 500mg
GTE-AGE(Glomerular tissue extract-advanced glycosylation end products) 人腎小球組織糖基化終末產物 CAS: 2002-29- 規格: 200mg
UP(Proteinuria) 人尿蛋白 CAS: 77326-96-6 規格: 200mg
LMP7/PSMB99low molecular-weight protein/proteasome beta-type subunit) 人低分子質量蛋白7/β型蛋白酶體9 CAS: 4246-84-7 規格: 300mg
Alpha2-MG(Alpha2 macroglobulin) 人α2巨球蛋白 CAS: 67-73-2 規格: 00mg
Kim-(Kidney injury molecule ) 人腎損傷分子 CAS: 356-2-7 規格: 00mg
AQP-5(Aquaporin 5) 人水通道蛋白5 CAS: 53954 規格: 200mg
AQP-4(Aquaporin 4) 人水通道蛋白4 CAS: 規格: 4.5oz
特點:
. 犬源性成分(Canine)核酸檢測試劑盒品牌即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。
2. 引物經過優化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。
用途:
. 方便,用戶只需準備模板和引物既可以進行PCR 實驗。
2. 快捷,操作步驟已經限度地簡化,能減少污染,降低實驗誤差。
3. 本產品A 型含電泳染料,PCR 反應液可直接上樣電泳,進一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經過精心優化,反應的靈敏度高,特異性強。能擴增各種常見的DNA 樣品。
5. 產物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應。
使用及效果:將本產品5 μL 與用戶自備的模板,引物和水共5 μL 混合后,直接進行PCR反(PCR 參數由用戶自己確定),反應結束后直接取0 μL 電泳檢查擴增結果。
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