富含半的酸性分泌蛋白抗體樣本的物種 應選擇物種相同或有交叉反應的抗體,抗體可能與不同物種的同種靶蛋白有交叉反應,因其氨基酸序列同源性較高,如果樣本的種類未列入抗體說明書上的交叉反應種屬表中,并不意味著該抗體不適用于檢測該物種的蛋白,而只是表示該物種尚未用此抗體檢測驗證過,應通過序列比對的方法來預測交叉反應,可應用Expasy 和 NCBI BLAST 來進行不同物種蛋白同源性比對。
富含半的酸性分泌蛋白抗體抗宿主物種的選擇一般說來,在使用偶聯二抗結合無偶聯物的一抗時,一抗宿主動物的物種選擇較為重要,對于免疫組化而言,盡可能選擇與樣本不同種系物種的一抗,從而避免二抗與樣本內源性免疫球蛋白產生交叉反應,例如:檢測小鼠樣本蛋白,則不應選擇小鼠或大鼠源的一抗,選兔源的一抗,則二抗則可選擇偶聯了檢測分子(酶、熒光素、等)的抗兔IgG。
如果選擇有偶聯物的一抗則不適用上述情況,除免疫組化外的其它對不含內源性免疫球蛋白樣本的檢測方法,則抗體宿主物種的影響不大,如對不含IgG 的細胞裂解物樣本的western blotting檢測,盡管如此,含有血清的組織裂解物和組織培養上清中含有免疫球蛋白,還原變性樣本中含IgG,在western blot 檢測中則結合出現IgG 分子50 and 25 kDa 的重鏈和輕鏈條帶。
二抗的選擇 二抗應選用與使用的一抗相同的物種來源,例如:如果你的一抗是小鼠的單克隆抗體,二抗則選抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建議檢查二抗說明書確保該抗體適用于你的檢測應用, 二抗一般連接熒光素FITC 或發光團。
上海谷研生物科技有限公司特殊抗體的保存條件:
. 酶聯抗體:永遠保存在4 度,避免凍起來。否則會導致酶活性的下降或者喪失
2. 偶聯抗體:所有偶聯抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存。尤其是熒光抗體,對
光極為敏感,因此在所有的實驗階段也是要避光操作的!
3. IgG3 的同型對照:永遠保存在4 度,避免凍起來。因為如果出現凍融過程,該抗體非常
容易形成多聚體無論是保存還是運輸,避免反復凍融!
反復凍融會導致抗體變性,導致多聚體形成,從而降低抗體的結合能力!
其它相關信息:
Anti-ADNP/NAP (Activity-dependent Neuroprotective protein )??活性依賴的神經保護肽抗體
Anti-ADORA3/A3AR(adenosine receptor A3)??腺苷受體A3
Anti-ADRA-alpha adrenergic receptor(alpha adr-enoceptor)??alpha-腎上腺素能受體抗體
Anti-ADRA2 (alpha2 adrenergic receptor)??alpha-2腎上腺素能受體抗體
Anti-ADRB (β-adrenergic receptor)??腎上腺素能受體β抗體
Anti-ADRB2 (β2-adrenergic receptor )??腎上腺素能受體β2抗體
Anti-ADRB3/β3-AR (β3-adrenergic receptor)??腎上腺素能受體β3抗體
Anti-AE3(anion exchanger protein 3)??陰離子交換蛋白3抗體
Anti-AEBP (Adipocyte enhance binding protein )??脂肪細胞增強結合蛋白
Anti-AFP (anti-Alpha Fetoprotein(AFP), for conjugation and detection)??鼠抗人甲胎蛋白抗體
Anti-AGER(Advanced glycosylation end product-specific receptor)(RAGE)??晚期糖基化終末產物特異性受體抗體
Anti-AGEs (advanced glycosylation end products)??晚期糖基化終末產物抗體
Anti-Aggrecan??軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗體
Anti-Agrin??聚集蛋白抗體
Anti-AhDMT ??抗植物蛋白大豆、花生AhDMT-抗體
Anti-AIF (Apoptosis-Inducing Factor)??調亡誘導因子抗體
Anti-AIF(Apoptosis-Inducing Factor)??調亡誘導因子抗體
Anti-AK-(Adenylate Kinase )??腺苷酸激酶-
Anti-ALK/CD246Ag (Anaplastic Lymphoma Kinase)??間變型淋巴瘤激酶抗體
關于加入甘油保存:有些人會加50%的甘油到抗體中來避免反復凍融,甘油在-20 度 會降低冰點。這對很多抗體可能是可行的。但是abcam 僅對非常小的一部分抗體檢測過其在這種條件下的穩定性;而abcam 只對按照條件保存的抗體提供質量保證!加入甘油的溶液不建議在-80 度保存,因為這已經超過了甘油的冰點。如果您要加入甘油來保存抗體的話,請謹慎注意無菌操作,避免污染!
關于蛋白保護劑:
蛋白在高濃度時更不容易降解( mg/ml 或者更高),這就是為什么在抗體中加入BSA 之類作為穩定劑的原因了;另一方面,加入的蛋白也可以減少抗體由于管壁吸附所造成的損失。但是如果抗體要用來標記的話,則不能加入蛋白穩定劑,因為這些穩定劑會和抗體一起競爭結合標記物。