臨床上多種病原生物如病毒、立克次體、衣原體、胞內(nèi)寄生的細(xì)菌、原蟲等的分離培養(yǎng)基和藥物敏感試驗(yàn)是通過細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)完成的,如人免疫缺陷病毒(HIV)和新近出現(xiàn)的嚴(yán)重急性呼吸綜合征(SARS)病毒等就是通過細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)的。臨床應(yīng)用微量全血培養(yǎng)技術(shù)診斷HIV的感染,已用于兒童HIV垂直感染的早期診斷及可疑感染者的確認(rèn)。
.病毒的分離的常用細(xì)胞
對病毒性疾病的病原學(xué)診斷,zui可靠的方法是從標(biāo)本中分離并鑒定出致病性病毒。由于病毒具有嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生性,對病毒的分離培養(yǎng)必須選用敏感的細(xì)胞培養(yǎng)基,包括動物、雞胚和細(xì)胞培養(yǎng)。目前zui被廣泛采用的方法就是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。用于病毒分離的細(xì)胞種類很多,由于不同種類病毒對細(xì)胞的敏感性不同,因此首先應(yīng)根據(jù)病毒的種類選擇敏感細(xì)胞進(jìn)行分離培養(yǎng)。細(xì)胞的種類按其來源、染色體特征及傳代次數(shù)等可分為原代細(xì)胞、二倍體細(xì)胞及傳代細(xì)胞3種類型。但由于原代細(xì)胞只能傳~3代,器官來源、操作繁鎖等問題使該方法應(yīng)用受限,而二倍體細(xì)胞和傳代細(xì)胞,由于可以傳代、培養(yǎng)方便,故較為常用。
2.體外抗病毒要效試驗(yàn)
抗病毒要效測定試驗(yàn)分為體內(nèi)試驗(yàn)和體外試驗(yàn)。體外試驗(yàn)是采用組織細(xì)胞培養(yǎng)基來觀察藥物的抗病毒作用。在實(shí)驗(yàn)中要根據(jù)藥物的特性來選擇病毒;根據(jù)病毒對細(xì)胞易感性選擇所用細(xì)胞;觀察藥效指標(biāo)常采用病毒致細(xì)胞病變(CPE)情況來判定藥物的抗病毒效果。下面以抗呼吸道病毒要物為例采用微量細(xì)胞培養(yǎng)法介紹藥物體外抑病毒試驗(yàn)方法。
0vail
25克 Cholic acid 牛膽酸 BR,98%
00克
500克
0克 Hyodeoxycholic acid 培養(yǎng)基 BR,98%
25克
00克
0克 Deoxycholic acid 去氧膽酸 BR,99%,有害品
00克
500克
0克 Dehydrocholic acid 脫氫膽酸 BR,98.5%
50克
500克
25克 Sodium dehydrocholate 脫氫膽酸鈉 BR,98%
5克 UDCS 烏索去氧膽酸 BR,98%
25克
5克 CDCA 培養(yǎng)基脫氧鵝膽酸 BR,98%
25克
00克
250克 Egg yolk powder 蛋黃粉 BR
500克 Agar 寒天 BR,強(qiáng)度200g/c㎡
25公斤
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