性能指標:點擊了解更多PCR檢測試劑盒。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現性為00%
3. 靈敏度可達到03/ml
4. 有效期為6個月?產品名稱:饒氏無綠藻PCR檢測試劑盒品牌
英文名稱:Prototheca zopfiiPCR
規格:詳見說明書
類別:PCR檢測試劑盒
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
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使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉錄)反應合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),
反應終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。?末端脫氧核苷轉移酶英文名(EN):Methyl laurate,≥98%CAS No.:-82-0規格(SP):00G類別(Key):通用試劑
Poly(A)聚合酶,E.coli英文名(EN):Ethyl methyl sulfonate,≥98.0%CAS No.:62-50-0規格(SP):5G類別(Key):通用試劑
Poly(U)聚合酶英文名(EN):Ethyl methacrylate,99%CAS No.:97-63-2規格(SP):00ML類別(Key):通用試劑
多核苷酸磷酸化酶英文名(EN):Ethyl acetoacetate,≥99%CAS No.:4-97-9規格(SP):00G類別(Key):通用試劑
SP6 RNA聚合酶英文名(EN):Methyl acetoacetate,≥99%CAS No.:05-45-3規格(SP):500G類別(Key):通用試劑
SP6 RNA聚合酶英文名(EN):Nω-Nitro-L-arginineCAS No.:249-70-4規格(SP):G類別(Key):通用試劑
T7 RNA聚合酶英文名(EN):Methyl gallate,98%CAS No.:99-24-規格(SP):50G類別(Key):通用試劑
T7 RNA聚合酶英文名(EN):Propyl gallate,≥98%CAS No.:2-79-9規格(SP):00G類別(Key):通用試劑
T3 RNA聚合酶英文名(EN):Dimethyl oxalate,≥99%CAS No.:553-90-2規格(SP):50G類別(Key):通用試劑
T3 RNA聚合酶英文名(EN):Dimethyl carbonate,≥99%CAS No.:66-38-6規格(SP):00ML類別(Key):通用試劑
T4 核酸內切酶 V英文名(EN):Diethyl carbonate,≥99%CAS No.:05-58-8規格(SP):00ML類別(Key):通用試劑
烷基腺嘌呤DNA糖基化酶英文名(EN):Dimethyl malonate,98%CAS No.:08-59-8規格(SP):00G類別(Key):通用試劑
甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶英文名(EN):Diethyl malonate,≥98%CAS No.:05-53-3規格(SP):00G類別(Key):通用試劑
8-氧代DNA糖基化酶英文名(EN):Dimethyl succinate,98%CAS No.:06-65-0規格(SP):00G類別(Key):通用試劑
-DNA糖基化酶英文名(EN):Dimethyl succinate,98%CAS No.:06-65-0規格(SP):00G類別(Key):通用試劑
糖基化酶抑制劑英文名(EN):Diethyl succinate,≥99%CAS No.:23-25-規格(SP):00G類別(Key):通用試劑
Afu - DNA 糖基化酶英文名(EN):Diethyl adipate,99%CAS No.:4-28-6規格(SP):00G類別(Key):通用試劑
切刻酶英文名(EN):Bis(2-ethylhexyl)adipate,≥99%CAS No.:03-23-規格(SP):00G類別(Key):通用試劑
饒氏無綠藻PCR檢測試劑盒品牌難辨梭狀芽胞桿菌(Cd)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
人博卡病毒(HBoV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
白喉桿菌(CD)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
猩紅熱鏈球菌(ST)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)規格備注
流行性腮腺炎病毒(MV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)0.ml綠色熒光,Jackson公司分裝
注意事項:
①加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。