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兔乳腺上皮細(xì)胞

【概要描述】兔乳腺上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5.1 (STR)人肝癌細(xì)胞小鼠原代胃黏膜上皮細(xì)胞大鼠原代子宮微血管內(nèi)皮細(xì)胞人原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞兔原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞小鼠原代脾基質(zhì)細(xì)胞人原代心臟血管平滑肌細(xì)胞小鼠原代輸尿管上皮細(xì)胞兔原代腎周細(xì)胞小鼠原代腎足細(xì)胞

型號(hào): 點(diǎn)擊量:484 廠商性質(zhì):代理商 更新日期:2025-03-21
產(chǎn)品詳情

兔乳腺上皮細(xì)胞

兔乳腺上皮細(xì)胞

規(guī)格

5×10?

貨號(hào)

GOY-01X0786

包裝

T25培養(yǎng)瓶

分類(lèi)

兔原代細(xì)胞

生長(zhǎng)特性

貼壁

組織來(lái)源

乳腺組織


兔乳腺上皮細(xì)胞

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)

培養(yǎng)基 FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%


兔乳腺上皮細(xì)胞

兔乳腺上皮細(xì)胞

兔乳腺上皮分離自乳腺組織;乳腺是復(fù)管泡狀皮膚腺,主要由腺上皮細(xì)胞組成,并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期,導(dǎo)管末梢發(fā)育成腺泡;近年來(lái)的許多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的發(fā)生都與乳腺上皮細(xì)胞(MEC)有密切聯(lián)系,體外分離培養(yǎng)MECs即成為研究開(kāi)展的關(guān)鍵步驟。乳腺是乳房的腺體組織,乳腺由導(dǎo)管和腺泡組成,腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常發(fā)育是由體內(nèi)激素和局部合成的生長(zhǎng)因子共同調(diào)控,其中乳腺表達(dá)的生長(zhǎng)因子對(duì)乳腺上皮細(xì)胞的增殖、分化、凋亡產(chǎn)生極大的影響。乳腺上皮分離自分娩后3-5天的乳腺組織,為貼壁生長(zhǎng)型細(xì)胞,呈多角形、圓形以及短梭形;乳腺上皮細(xì)胞主要功能即生乳功能。
方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔乳腺上皮采用yi蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔乳腺上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 

兔乳腺上皮細(xì)胞

一、細(xì)胞培養(yǎng)

1取材 在無(wú)菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞(視實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ǎ?jīng)過(guò)一定的處理(如消化分散細(xì)胞、分離等)后接入培養(yǎng)器血中,這一過(guò)程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無(wú)取材這一過(guò)程。機(jī)體取出的組織細(xì)胞的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。2培養(yǎng) 將取得的組織細(xì)胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過(guò)程稱為培養(yǎng)。3凍存及復(fù)蘇(可參閱后面有關(guān)章節(jié))為了保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度-196℃,將細(xì)胞收集至凍存管中加入含保護(hù)劑(一般為二甲亞砜或甘油)的培養(yǎng)基,以一定的冷卻速度凍存,最終保存于液氮中。在極低的溫度下,細(xì)胞保存的時(shí)間幾乎是無(wú)限的。復(fù)蘇一般采用快融方法,即從液氮中取出凍存管后,立即放入37℃水中,使之在一分鐘內(nèi)迅速融解。然后將細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)器皿中進(jìn)行培養(yǎng)。

二、原代細(xì)胞分離

凡是來(lái)源于胚胎、組織器官及外周血,經(jīng)特殊分離方法制備而來(lái)的原初培養(yǎng)的細(xì)胞稱之為原代細(xì)胞。1懸浮細(xì)胞的分離方法組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。2實(shí)體組織材料的分離方法對(duì)于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

三、細(xì)胞增殖檢測(cè)技術(shù)

目前主要有兩種用于檢測(cè)細(xì)胞增殖能力的方法。一種是直接的方法,通過(guò)直接測(cè)定進(jìn)行分裂

的細(xì)胞數(shù)來(lái)評(píng)價(jià)細(xì)胞的增殖能力。另一種是間接的方法,即細(xì)胞活力(cell viability)檢測(cè)方法,通過(guò)檢測(cè)樣品中健康細(xì)胞的數(shù)目來(lái)評(píng)價(jià)細(xì)胞的增殖能力。顯然,細(xì)胞活力檢測(cè)法并不能最終證明檢測(cè)樣品中的細(xì)胞是否在增殖。如細(xì)胞在某一培養(yǎng)條件下會(huì)自發(fā)啟動(dòng)凋亡程序,但藥物的干擾可抑制凋亡的發(fā)生;這時(shí)若采用細(xì)胞活力檢測(cè)法,顯然可以區(qū)分兩種條件下的細(xì)胞數(shù)量,但我們并不能從藥物干擾組細(xì)胞數(shù)大于對(duì)照組的事實(shí)說(shuō)明藥物可促進(jìn)細(xì)胞增殖的結(jié)論。所以最直接的證據(jù)應(yīng)該采用方法一。

兔乳腺上皮細(xì)胞

兔乳腺上皮細(xì)胞

取材:首先,用培養(yǎng)液濕潤(rùn)所取的組織材料,并用鋒利的眼科剪去除附在其上的脂肪和結(jié)締組織。接著用平衡液(如PBS或Hanks液)漂洗,再用眼科彎剪將組織塊剪成小塊。多次用PBS或Hanks液漂洗,直到液體清亮、無(wú)油滴為止。

接種:用濕潤(rùn)的吸管吸取切碎的組織塊,輕輕吹到培養(yǎng)瓶皿中,并按一定間距均勻放在培養(yǎng)瓶底壁上。注意不要過(guò)多,確保組織塊切面貼在培養(yǎng)瓶底壁上。

培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶翻轉(zhuǎn),使瓶底朝上,在種植了組織塊一側(cè)的對(duì)側(cè)面加足培養(yǎng)液,避免組織塊與培養(yǎng)液接觸,然后塞緊瓶塞。將種植了組織塊的一側(cè)朝上,靜置于37℃培養(yǎng)箱中。待組織塊貼壁1到3小時(shí)后翻瓶,使貼壁的組織塊浸沒(méi)在培養(yǎng)液中,繼續(xù)靜置。換液:每隔2到3天更換一次培養(yǎng)液,或者根據(jù)培養(yǎng)瓶種顏色的變化確定換液時(shí)間。

一、原代細(xì)胞計(jì)數(shù)

將血球計(jì)數(shù)板及蓋片用擦試干凈,并將蓋片蓋在計(jì)數(shù)板上。

將細(xì)胞懸液吸出少許,滴加在蓋片邊緣,使懸液充滿蓋片和計(jì)數(shù)板之間。

靜置3分鐘。

鏡下觀察,計(jì)算計(jì)數(shù)板四大格細(xì)胞總數(shù),壓線細(xì)胞只計(jì)左側(cè)和上方的。然后按下式計(jì)算:

細(xì)胞數(shù)/ml=4大格細(xì)胞總數(shù)/ 4×10000

注意:鏡下偶見(jiàn)由兩個(gè)以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán),應(yīng)按單個(gè)細(xì)胞計(jì)算,若細(xì)胞團(tuán)占10%以上,說(shuō)明分散不好,需重新制備細(xì)胞懸液。

二、原代細(xì)胞活力

將細(xì)胞懸液以0.5ml加入試管中。

加入0.5ml 0.4%臺(tái)盼蘭染液,染色2一3分鐘。

吸取少許懸液涂于載玻片上,加上蓋片。

鏡下取幾個(gè)任意視野分別計(jì)死細(xì)胞和活細(xì)胞數(shù),計(jì)細(xì)胞活力。

死細(xì)胞能被臺(tái)盼蘭染上色,鏡下可見(jiàn)深蘭色的細(xì)胞,活細(xì)胞不被染色,鏡下呈無(wú)色透明狀。

活力測(cè)定可以和細(xì)胞計(jì)數(shù)合起來(lái)進(jìn)行,但要考慮到染液對(duì)原細(xì)胞懸液的加倍稀釋作用。

兔乳腺上皮細(xì)胞


人肝癌細(xì)胞QGY-7701 (STR鑒定正確)

人晶體上皮細(xì)胞SRA01/04(STR鑒定正確)

人張氏肝細(xì)胞Changliver(STR鑒定正確)

花青

人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞帶熒光MM.1S+LUC(STR鑒定正確)

頭磺吡芐鈉鹽水合物

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H23(STR鑒定正確)

高氯銅(II)六水合物

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SK-N-SH(STR鑒定正確)

丙鈣

豬內(nèi)皮細(xì)胞PED(種屬鑒定)

克里唑蒂尼

人結(jié)腸癌細(xì)胞HT-29(STR鑒定正確)

變色 2R

小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞;DCS

18-冠醚-6

人非小細(xì)胞肺癌腺癌細(xì)胞NCI-H522 (STR鑒定正確)

硫鈷,七水

小鼠腫瘤細(xì)胞系B82 (種屬鑒定)

L-胱氨鹽鹽

人體細(xì)胞/人胚肺成纖維細(xì)胞2BS (STR鑒定正確)

二甲基丁葉醇酯

兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞CCC-SMC-1(種屬鑒定)

L-肉毒堿鹽鹽

人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞hRMECs

兔乳腺上皮細(xì)胞頭匹羅硫鹽

人彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞OCI-LY3(STR鑒定正確)

頭吡肟鹽鹽

BMS-833923

頭克洛單水物

 


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