在采集樣品之前必須有一個完整的計劃,清楚要測試的成分是否足夠穩(wěn)定。同一回采集的ELISA樣本被及時存放在4℃。對于第二天測試的樣本,樣品應(yīng)在加載后的-20℃及時冷凍。如果有條件,將它們冷凍到-70℃。標本應(yīng)避免反復(fù)凍融。
液體標本:包括血清、血漿、尿液、胸水和腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清液等。
一、血清
室溫自然凝固0-20分鐘后,將血液離心約20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集清洗。如果保存過程中出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
二、等離子體
應(yīng)根據(jù)樣品的要求選用EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑。混合0-20分鐘后,離心約20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
三、尿液
用無菌管收集,離心約20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集清洗。如果保存過程中有沉淀形成,應(yīng)再次離心。根據(jù)這一做法,以胸水、胸水和腦脊液(腦脊液)為參考。
四、細胞培養(yǎng)上清
檢測分泌成分時,用無菌管收集,離心20分鐘(每分鐘2000-3000轉(zhuǎn)),仔細收集。
五、培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)組分時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度約為00萬/ml。通過反復(fù)凍融或添加組織蛋白提取劑,細胞被破壞,細胞內(nèi)成分釋放。離心20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集清洗。如果保存過程中有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
六、組織標本
切完標本后,稱重。加入一定量的PBS,pH7.4。用液氮快速冷凍。試樣熔化后溫度保持在2-8℃。加入一定量的PBS(pH7.4)或組織蛋白提取劑,樣品用手或勻漿機均勻化。離心20分鐘左右(2000-3000 rpm)。仔細收集清洗。一份經(jīng)過單獨加載后將進行測試,其余的將被冷凍并存放。(內(nèi)容僅供參考,如有問題或遇到問題請在線咨詢,我們會竭誠為您服務(wù))
聯(lián)系方式
郵箱:goy_shanghai@163.com 地址:上海市嘉定區(qū)澄瀏公路52號盛創(chuàng)企業(yè)