為了成功的操作
小鼠ELISA試劑盒,需要在確立穩健的多色配色方案,確定正確對照和進行重復性好的分析上花費大量的時間和精力。除了資源共享實驗室和核心設備花費大量的時間在儀器質量控制上,研究人員也會把質量控制結合進他們的實驗中。質量控制管能實現確保實驗之間的PMT電壓一致,能確保實驗正確進行并且能確保設門策略具有說服力。
洗板時容易造成誤差:因為洗板是人工洗的,所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的,這個時候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動;
小鼠ELISA試劑盒的顯色問題:使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時間太長,都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進行顯色反應的時候,要先查看顯色劑本身的情況;
試劑的選擇:選擇優良試劑大家都是知道的,但是在檢測之前還應該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍;
加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候,會碰到血清血漿不好分離的情況,這個時候的解決辦法是先放在常溫中到2小時,然后在進行離心處理;
讀板:讀板的時候首先應該保證板的清潔干凈;
終止反應:在加終止劑的時候由于傾倒速度快,差生氣泡,造成假陽性結果。所以在倒終止劑的時候要緩慢倒;
一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到5pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統可在一定范圍內提高靈敏度。
根據檢測標本數量確定所需試劑的量;
按說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑;
準備好所有實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等;
標本制備要規范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備,盡量分裝做備份。短期內無法實驗者,注意低溫保存。