.維生素是人類及動(dòng)物細(xì)胞維持生命和生長(zhǎng)所需的一種活性物質(zhì)。許多維生素是酶的輔酶和輔基的組成部分,對(duì)細(xì)胞的代謝有重大的影響,某些維生素缺乏,短期可引起細(xì)胞死亡。維生素的需求量隨細(xì)胞而異,如、、、泛酸、吡多醇、核黃素、硫胺素及B2等在很多常用限定培養(yǎng)基中已成為固定組成成分。也是不可少的,它對(duì)具有合成膠原能力的細(xì)胞尤為重要,但易氧化,不很穩(wěn)定。脂溶性維生素對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)也有作用,它們常從血清中得到補(bǔ)充。
2.無(wú)機(jī)離子和微量元素鈉、鉀、鎂、鈣、磷、氮等無(wú)機(jī)離子是細(xì)胞生長(zhǎng)所必需的,它們參與細(xì)胞的代謝,是細(xì)胞組成所需要的。此外,微量元素鐵、鋅、硒等也是細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的。細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)用的平衡鹽溶液主要含鈉、鉀、鈣、鎂等陽(yáng)離子,其比例與海水或高等動(dòng)物血液內(nèi)的比例相似。
()鈉:鈉在體內(nèi)主要維持水、滲透壓及pH的平衡。鈉離子是細(xì)胞外主要的陽(yáng)離子,它可降低外質(zhì)的黏度,促進(jìn)外質(zhì)的溶膠化,而在細(xì)胞內(nèi)則可增加內(nèi)質(zhì)的黏度,能使球蛋白保持溶液狀態(tài),能增加組織細(xì)胞的應(yīng)激性與增高細(xì)胞膜的滲透性,對(duì)維持滲透壓的恒定及細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)有決定性作用。在L和HeLa細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),Na+zui適濃度為00~200nmol/L。,Cl-的適宜濃度為50mmol/L(淋巴細(xì)胞除外)。
(2)鉀:鉀是激活細(xì)胞內(nèi)某些酸所必需的。L和HeLa細(xì)胞對(duì)鉀的zui適濃度是~0mmol/L,缺鉀8小時(shí)以上,細(xì)胞變圓,胞質(zhì)內(nèi)顆粒增加,細(xì)胞界限不清楚,并產(chǎn)生一種特殊的樹(shù)枝形細(xì)胞,24小時(shí)后細(xì)胞脫落死亡。
(3)鈣:鈣對(duì)維持細(xì)胞膜的堅(jiān)固和滲透性,對(duì)保持神經(jīng)和肌肉組織的正常興奮性有很大作用。許多酶如酯酶、琥珀酸脫氫酶、三磷腺苷等都必須有鈣的存在才有活性。鈣對(duì)細(xì)胞黏著性也很重要,在無(wú)血清存在時(shí),高濃度的鈣離子可幫助細(xì)胞貼壁,如pH7.6~7.8時(shí)鈣離子保護(hù)帶電荷群,使細(xì)胞穩(wěn)固的貼壁。各種細(xì)胞所需鈣的濃度不同,L細(xì)胞的zui適濃度是~2mmol/L,HeLa細(xì)胞的zui適濃度是0.~O.2 mmol/L。
(4)鎂:在細(xì)胞內(nèi)鎂是糖代謝某些酶系統(tǒng)的參與者。鎂對(duì)細(xì)胞的貼壁也有重要作用,較高的鎂離子可促進(jìn)培養(yǎng)物的生長(zhǎng)。鼠成纖維細(xì)胞zui適濃度是O.~O.2mmol/L。
(5)磷:磷酸鹽是細(xì)胞和細(xì)胞問(wèn)液的組成成分,它參與一切基本物質(zhì)如蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂肪、維生素的代謝,是能量ATP必*成分,可形成高能磷酸鍵以供細(xì)胞生命活動(dòng)所需之能量。另外,它對(duì)維持組織內(nèi)的酸堿平衡起著重要作用。HeLa細(xì)胞適宜濃度是O.06~O.2mmol/L。
(6)碳:重碳酸鹽與CO2對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖很重要。它能使培養(yǎng)物產(chǎn)生zui大糖分解以利細(xì)胞生長(zhǎng),可維持和調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,因此通常在人工培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
(7)微量元素:鐵、鋅、硒等微量元素對(duì)維持細(xì)胞的正常生理功能也同樣起著重要作用。如鐵是組成細(xì)胞色素與細(xì)胞色素氧化酶等物質(zhì)的成分;鋅與細(xì)胞增殖有一定的關(guān)系。在體內(nèi)它們大多數(shù)與有機(jī)化學(xué)物相結(jié)合。在組織細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),把上述微量元素加到人工培養(yǎng)基中,低濃度或適量對(duì)細(xì)胞的生存與增殖有一定作用,濃度過(guò)高對(duì)細(xì)胞有毒性,要特別注意。各種細(xì)胞對(duì)無(wú)機(jī)鹽的需要是不同的。一般來(lái)說(shuō),氯、鈉、鉀、鈣、鎂、磷是重要的無(wú)機(jī)鹽成分,它們也有相互拮抗作用。如鈣和鎂能使細(xì)胞膜滲透性降低,而鉀和鈉能使細(xì)胞滲透性增高。鉀和鈉能使肌肉收縮性喪失,而鈣和鎂能恢復(fù)肌肉的收縮性。鎂的毒性作用可用鈣來(lái)解除。因此,這些離子在溶液中只有保持一定的比例,才可以使細(xì)胞維持正常的生理平衡狀態(tài)。
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