粘附劑
在免疫細胞化學工作中,由于標本(如切片)的脫落常影響工作的質量的速度,故粘附劑的選擇和使用就顯得較為重要。
、鉻礬明膠液
試劑:鉻礬 0.5 g
明膠(Gelatine) 5 g
H2O ~000 ml
方法:在000 ml的燒杯或燒瓶中,以500~800 ml H2O加溫溶解明膠,待其*溶解后,再加入鉻礬。注意溫度過高易使明膠燒糊,包被玻片時控制水溫在70 ℃。如有明顯殘渣,過濾后使用。
2、甲醛-明膠液
試劑:40%甲醛 2.5 ml
明膠 0.5 g
蒸餾水 至00 ml
配制方法:用少許蒸餾水(約80 ml)加熱溶解明膠,待*溶化后,加入甲醛,zui后補充蒸餾水至00 ml混勻即可。細胞
3、多聚賴氨酸(Poly-L-Lycine,PLL)
試劑:多聚賴氧酸 5 g
蒸餾水 ~000 ml
配制方法:稱取PLL,溶于H2O,充分混合即可,此液濃度為0.5%,可適當稀釋配成0.0~0.5%濃度。4 ℃保存,也可-20 ℃備用。PLL可反復冰凍,效果無明顯影響,工作液常再稀釋0~50倍。
4、Vectabond試劑 該試劑是Vector公司新進推出的一種新型玻片粘附劑。該試劑與一般的粘附劑不同,它是通過對玻璃表面起化學修飾作用,改變其表面的化學物理特性,使組織切片牢固地貼于玻璃片上,貼上后不易脫落,保留時間較久。一個試劑盒(7 ml)可配成350 ml工作液(用丙酮配)。處理載玻片前(事先酸處理),用染色缸裝好各種液體,按下列程序進行:
干凈載玻片→丙酮5 min→Vectabond試劑工作液(7 ml Vectabond+ 350 ml丙酮):將載玻片用鑷子夾住浸入Vectabond試劑~2次→dH2O,2×5 min→干燥(37 ℃過夜)→用鋁箔包好,室溫存放備用。細胞
注意:避免污染(塵埃等);綜上述方法處理的載片一般可存放半年以上。