研究揭示單克隆抗體時動物的選擇與免疫
一、動物的選擇
目前應用zui廣的是小白鼠和大白鼠,尤以小白鼠為好。就品系而言以Balb/c小白鼠應用zui廣,因為所有的小白鼠骨髓瘤系均從Balb/c小白鼠系誘導出來。Balb/c系小白鼠必須用純系的,雌雄均可,以8~2周齡為宜。大白鼠也可,能產生較多量的單抗體。現在已經在小鼠雜交瘤的基礎上,發展了小鼠-大鼠,小鼠-人以及人-人雜交瘤技術。
二、免疫
一般而言,抗原的純度不很重要,特別是免疫原性較強的抗原。免疫程序、劑量和方法是關系到是否能得到所需要的單抗體的關鍵之一。正常小鼠脾臟含有能產生各種不同抗體的B淋巴細胞,一只純種小白鼠估計能產生.0×07~5.0×07種不同的抗體。因此一只正常的小白鼠的脾細胞與小鼠骨髓瘤融合,只能有千萬分之一的機會獲得某一種特定抗體。所以為了提高得到某種雜交瘤的機會,必須加強免疫,使產生特異性抗體的B淋巴細胞大量增加。B淋巴細胞的不同發育階段對獲得陽性雜交瘤也有很大影響。有人認為處在轉化時期的B淋巴細胞可能更易于融合,而免疫以后7~8天,雖然是抗體產生的高峰時期,但形成有活力的雜交瘤細胞的可能反而減少。故一般認為加強免疫后的第三天應殺鼠取脾做細胞融合。
. 可溶性抗原(蛋白質) 以mg/ml~5mg/ml的溶液加等量的弗氏*佐劑乳化,分多點小鼠皮下注射,總量為0.3ml~0.6ml,間隔3-5周再同樣注射一次,0天后,斷尾取血一滴,測抗體效價,選滴度高的小鼠做融合試驗。一個月后可以經靜脈(尾靜脈)給予無佐劑抗原0.2ml~0.4ml,3~4天后,殺死小鼠取脾做融合用。
2. 顆粒性抗原 如抗原來源方便,可以不加佐劑而增加免疫次數,縮短間隔時間。例如用羊紅血球免疫小白鼠,以%濃度每只皮下注射0.2ml,每周2次,共免疫5-8次,取脾前3天,再免疫一次即可。有人認為zui后一次免疫劑量要大,大到近于免疫耐受的程度更好。
BTC Protein Human 重組人 BTC / Betacellulin 蛋白
EGF Protein Mouse 重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白
BTC Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BTC / Betacellulin 蛋白 (Fc 標簽)
BTC Protein Human 重組人 BTC / Betacellulin 蛋白 (Fc 標簽)
NRG Protein Human 重組人 NRG-beta 蛋白 (ECD)
NRG Protein Human 重組人 NRG-beta 蛋白 (ECD, Fc 標簽)
NRG Protein Human 重組人 NRG-alpha 蛋白 (ECD, His 標簽)
NRG Protein Human 重組人 NRG-alpha 蛋白 (ECD, Fc 標簽)
NRG Protein Human 重組人 NRG-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標簽)
NRG4 Protein Human 重組人 NRG4 蛋白
NRG Protein Human 重組人 NRG-beta 蛋白 (ECD, Fc 標簽)
NRG Protein Human 重組人 NRG-beta 蛋白 (EGF Domain, Fc 標簽)
EGF Protein Canine 重組狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白 (His 標簽)
EGF Protein Mouse 重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 標簽)
LRIG Protein Mouse 重組小鼠 LRIG / LIG- 蛋白 (His 標簽)
HBEGF Protein Human 重組人 HBEGF / DTR 蛋白
EGFL7 Protein Mouse 重組小鼠 EGFL7 / VE-statin 蛋白 (His 標簽)
EREG Protein Human 重組人 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標簽)
EREG Protein Mouse 重組小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標簽)
EGFL7 Protein Human 重組人 EGFL7 / VE-statin 蛋白 (His 標簽)
EGF Protein Human 重組人 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白
BTC Protein Mouse 重組小鼠 BTC / Betacellulin 蛋白 (His & Fc 標簽)
EGF Protein Human 重組人 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 標簽)