谷研試劑-人,3-βD葡葡糖苷酶(,3-βD-Glu)酶聯免疫分析  試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。

  96T

使用目的：

本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中           ,3-βD   葡葡糖苷酶(,3-βD-Glu)

表達。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人 ,3βD 葡葡糖苷酶(,3βDGlu)表達。用純化的

人 ,3βD 葡葡糖苷酶(,3βDGlu)抗體包被微孔板，制成固相抗體，可與樣品中 ,3-βD

葡葡糖苷酶(,3-βD-Glu)相結合，經洗滌除去未結合的抗原和其他成分后再與 HRP 標記的

,3-βD   葡葡糖苷酶(,3-βD-Glu)抗體結合，形成抗體 抗原 酶標抗體復合物，經過*洗

滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終

的黃色。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），與 CUTOFF 值相比較，從而判定

標本中人 ,3-βD 葡葡糖苷酶(,3-βD-Glu)的存在與否。

試劑盒組成

    30 倍濃縮洗滌液

2     酶標試劑

3     酶標包被板

4     樣品稀釋液

5     顯色劑 A 液

6     顯色劑 B 液

標本要求

20ml× 瓶

6ml× 瓶

2 孔×8 條

6ml× 瓶

6ml× 瓶

6ml×/瓶

7      終止液

8      陽性對照

9      陰性對照

0     說明書

    封板膜

2     密封袋

6ml× 瓶

0.5ml× 瓶

0.5ml× 瓶

份

2 張

個

．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能

馬上進行試驗，可將標本放于20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

.      編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照

孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）

2.      加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照            50%l。然后在待測樣品孔先

加樣品稀釋液                                        40%l，然后再加待測樣品    0%l。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不

觸及孔壁，輕輕晃動混勻，

3.    溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.    配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5.    洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此

重復 5 次，拍干.

6.    加酶：每孔加入酶標試劑 50%l，空白孔除外。

7.    溫育：操作同 3。

8.    洗滌：操作同 5。

9.    顯色：每孔先加入顯色劑 A50%l，再加入顯色劑 B50%l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色

5 分鐘.

0.   終止：每孔加終止液 50%l，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

.   測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。     測定應在加終止

液后 5 分鐘以內進行。

操作程序總結：

計算和結果判定：

試驗有效性：陽性對照孔平均值≥.00;  陰性對照平均值≤0.0

臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.5

陰性判定：樣品 OD 值<  臨界值（CUT  OFF）者為 ,3-βD 葡葡糖苷酶(,3-βD-Glu)

陰性

陽性判定：樣品 OD 值≥  臨界值（CUT  OFF）者為 ,3-βD 葡葡糖苷酶(,3-βD-Glu)

陽性

。

注意事項

．操作嚴格按照說明書進行，本試劑不同批號組分不得混用。

2．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 530 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未

用完，板條應裝入密封袋中保存。

3．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

5．底物請避光保存。

6．試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準，使用雙波長檢測時，參考波長為 630nm

7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸，使用時必須

注意安全。

保存條件及有效期

．試劑盒保存：；28℃。

2．有效期：6 個月