ELISA，即酶聯(lián)免疫吸附測定（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay），它的核心原理基于抗原與抗體之間的特異性結合反應。抗原是能夠刺激機體產生免疫應答，并能與免疫應答產物抗體和致敏淋巴細胞在體內外結合，發(fā)生免疫效應（特異性反應）的物質；抗體則是機體在抗原刺激下，由B淋巴細胞或記憶細胞增殖分化成的漿細胞所產生的、可與相應抗原發(fā)生特異性結合的免疫球蛋白。這種特異性結合就像一把鑰匙開一把鎖，具有較高的精準度。
ELISA試劑盒的檢測過程通常包含以下幾個關鍵步驟。首先是包被，將已知的抗原或抗體固定在固相載體表面，常用的固相載體有聚苯乙烯微量反應板。這一步就像是給目標物質搭建了一個“專屬座位”，使其能夠穩(wěn)定地附著在載體上，等待后續(xù)的反應。
接著是加樣，將待測樣本加入到包被有抗原或抗體的反應孔中。如果樣本中含有與包被抗原或抗體相對應的物質，它們就會發(fā)生特異性結合，形成抗原-抗體復合物。這一過程是ELISA檢測的關鍵環(huán)節(jié)，特異性結合保證了檢測結果的準確性，避免了其他物質的干擾。
然后是加酶標記抗體或抗原。酶標記是一種將酶與抗體或抗原結合的技術，常用的酶有辣根過氧化物酶（HRP）和堿性磷酸酶（ALP）。酶標記的抗體或抗原能夠與已經形成的抗原-抗體復合物進一步結合，這樣就將酶引入到了反應體系中。
之后是顯色反應。加入酶的底物后，酶會催化底物發(fā)生化學反應，產生可檢測的信號，通常是顏色變化。顏色變化的深淺與樣本中目標物質的含量成正比，通過酶標儀等儀器測量吸光度值，就可以定量分析樣本中目標物質的濃度。
最后是結果判定。根據(jù)標準曲線，將測得的吸光度值轉換為相應的目標物質含量，從而得出檢測結果。
ELISA試劑盒憑借其靈敏度高、特異性強、操作簡便等優(yōu)點，在生物檢測領域發(fā)揮著不可替代的作用。從疾病的早期診斷到藥物研發(fā)中的生物標志物檢測，從食品安全中的有害物質篩查到環(huán)境監(jiān)測中的污染物分析，ELISA試劑盒都為我們提供了有力的技術支持，幫助我們更好地了解生命科學和保障人類健康。
