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HCG在放射免疫法中的測定

更新時間:2013-01-09 點擊量:1673

 詳情請看:HCG在放射免疫法中的測定

一、原理

HCG是放射性同位素標記技術(shù)與抗原抗體免疫反應相結(jié)合的超微量分析法,是用放射性核素(如25I/3H)標記的極微量的示蹤抗原*(Ag*)/抗體*(Ab*)與待測抗原Ag/抗體Ag)一起來競爭結(jié)合有限的特異性抗體(Ab)/抗原(Ag),故稱飽和分析或競爭抑制法,其反應過程為:Ag*•Ab量固定,Ag*+Ag>Ab可結(jié)合的數(shù)目(抗原過量),Ag*與Ag競爭結(jié)合Ab,直到反應達到平衡,形成的AD*•Ab量隨著Ag量改變:Ag量大,與Ab結(jié)合的機會多,Ag*•.Ab少,反之,則形成的Ag*•.Ab多。Ag量與Ag*.Ab量之間可以競爭抑制曲線表示。

二、方法

放射免疫測定必須有3種基本試劑:

()能與待測物(配體)專一結(jié)合的結(jié)合試劑,通常是專一抗體受體;

(2)具有放射活性的配體標記物,常用的核素有25I及3He;

(3)能將與試劑結(jié)合的配體與未結(jié)合的配體分離的分離試劑。

在競爭性測定中,加入定量的抗體和標記配體,反應中未標記配體(待測物)與標記配體競爭結(jié)合試劑,未標記配體的量愈多,標記配體與抗體相結(jié)合的概率就愈低,從而標記配體的結(jié)合部分(B)低,經(jīng)過一定時間抗體與配體的結(jié)合達到平衡狀態(tài)后,可用分離試劑結(jié)合的配體(B)與未結(jié)合的配體(F)分離,用計數(shù)器計數(shù)結(jié)合部分(B)標本中的HcG量可通過比較標本B的計數(shù)與標準品的計數(shù)(標準曲線)求得。

()25碘一尿HCG(PEG)藥盒組分包括:HCG標準管6瓶,凍干;HCG抗體(藍色)瓶,凍干;25碘一HCG(紅色)瓶,凍干;正常兔血清5瓶,凍干;磷酸鹽緩沖液瓶,溶液;PEG 瓶,溶液。曲線范圍50~200Iu/L。

標準曲線:以標準濃度為橫坐標,以結(jié)合率為縱坐標,繪制標準曲線,依此求得標本的HCG一β濃度。

正常參考值:<250U/L。

保存:2~8℃。

有效期:35天。

(2)25碘一HCG(PR=免疫分離試劑)藥盒組分包括:HCG標準6瓶,凍干;HCG抗體(藍色)瓶,凍干;25碘一HCG(紅色)瓶,凍干;NSB 瓶,溶液;溫育液l瓶,溶液;PR 瓶,溶液。

曲線范圍:25~2000Iu/L。

靈敏度:<25IU/L。

標準曲線:以標準濃度為橫坐標,以結(jié)合率為縱坐標繪制標準曲線,以此求得標本的HCG一β濃度。

正常參考值:<00Iu/L。

保存:2~8℃。

有效期:35天。

(3)25碘一HCG—B(DAP=雙抗+PEG)藥盒組份包括:

HCG標準6瓶,凍干;HCG—B抗體(藍色)瓶,凍干;25碘一HCG(紅色)瓶,凍干;DA 2瓶,凍干;溫育液瓶,溶液;PEG 瓶,溶液。

曲線范圍:5~320Iu/L。

靈敏度:5IU/L。

特異性:抗HCG—B血清與LH的交叉反應率<5%。

標準曲線:以標準濃度為橫坐標,以結(jié)合率為縱坐標繪制標準曲線,以此求得HCG—β濃度。

正常參考值:<20Iu/L。

保存:2~8℃。

有效期:35天。

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